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異亮氨酸含量檢測(cè)方法
來(lái)源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-07-24 | 185 次瀏覽 | 分享到:

異亮氨酸是人體必需氨基酸之一,屬于脂肪族中性氨基酸,更是一種具有旋光性的有機(jī)物。異亮氨酸是一種支鏈氨基酸,能夠很快分解轉(zhuǎn)化為葡萄糖,防止肌肉組織的受損。當(dāng)人體在鍛煉運(yùn)動(dòng)的時(shí)候,會(huì)消耗一定的能量和熱量,肌肉組織會(huì)不斷發(fā)生機(jī)械重復(fù)活動(dòng)。當(dāng)肌肉摩擦運(yùn)動(dòng)的時(shí)候,有能量被消耗,甚至不足夠維持肌肉運(yùn)動(dòng)的時(shí)候,就會(huì)產(chǎn)生肌肉受損。而異亮氨酸能夠快速分解成葡萄糖,補(bǔ)充足夠的能量。異亮氨酸的來(lái)源有很多,比如糙米、豆類、堅(jiān)果、全麥等,缺乏的話就會(huì)出現(xiàn)低血糖癥狀,過(guò)量的話會(huì)出現(xiàn)皮炎、腹瀉等問(wèn)題。



檢測(cè)樣品中異亮氨酸含量的方法,主要包括高效液相色譜(HPLC)法、氨基酸分析法、液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)法等。


1.高效液相色譜(HPLC)法


HPLC測(cè)異亮氨酸,就是利用色譜柱將樣品中的化合物分離,并在流動(dòng)相的作用下洗脫出來(lái),在檢測(cè)器內(nèi)獲取對(duì)應(yīng)的信號(hào)值,并在軟件中記錄色譜圖的峰值和峰面積。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線或內(nèi)標(biāo)法,計(jì)算出樣品中的異亮氨酸含量。對(duì)于檢測(cè)效果怎么樣,其實(shí)很大程度上取決于色譜條件。比如,采用C18的色譜柱,三氟乙酸-乙腈為流動(dòng)相,流速0.8mL/min,進(jìn)樣量20uL,ELSD檢測(cè)器等。懂技術(shù)的就能學(xué)起來(lái)容易,做起來(lái)難,能做好真的需要耐心鉆研。這種方法準(zhǔn)確率高,靈敏度也高,被廣泛用在氨基酸檢測(cè)。



2.液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)法


LC-MS是結(jié)合了液相色譜和質(zhì)譜的優(yōu)點(diǎn),在HPLC內(nèi)進(jìn)行高效分離,并利用質(zhì)譜檢測(cè)器對(duì)化合物進(jìn)行定性和定量測(cè)定。能夠從復(fù)雜的、微量的樣品中將異亮氨酸進(jìn)行分離,并準(zhǔn)確、高效的檢測(cè)出來(lái),根據(jù)荷質(zhì)比,推斷化合物的分子結(jié)構(gòu)和豐度。選擇適宜的檢測(cè)參數(shù),是LCMS檢測(cè)的關(guān)鍵。


另外,還可以根據(jù)情況適用毛細(xì)管電泳法,即利用電場(chǎng)力使帶電的氨基酸在毛細(xì)管中遷移,根據(jù)遷移時(shí)間的不同進(jìn)行分離和檢測(cè)。


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