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植物維生素C含量測(cè)定方法
來(lái)源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-05-10 | 373 次瀏覽 | 分享到:

植物組織體內(nèi)的維生素C能夠增強(qiáng)植物的抵抗力,防止有害物質(zhì)的入侵,提高防病能力。具有抗氧化的作用,防止植物過(guò)早的進(jìn)入早衰狀態(tài)。它還能夠保護(hù)細(xì)胞,防止毒素或自由基對(duì)細(xì)胞的傷害,確保新陳代謝的正常進(jìn)行。維生素C可以作為一種藥物,用于促進(jìn)植物的生長(zhǎng),減少病蟲(chóng)害,達(dá)到優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的目的。



檢測(cè)植物組織體內(nèi)的維生素C含量的方法有碘量法、2,6-二氯靛酚法、N-溴琥珀酰亞胺(NBS)滴定法、比色法、紫外分光光度法、高效液相色譜法。


1.碘量法


這種方法就是利用維生素C在酸性溶液中,以淀粉為指示劑,用碘滴定的方法來(lái)確定含量的。用碘滴定液去滴定樣品溶液,當(dāng)溶液出現(xiàn)藍(lán)色的時(shí)候,而且30s內(nèi)不會(huì)褪色,就是滴定終點(diǎn)了。在滴定的過(guò)程中,因?yàn)榫S生素C和氧氣接觸的時(shí)候會(huì)發(fā)生氧化反應(yīng),導(dǎo)致維生素C含量降低。因此,在配置溶液的時(shí)候,要采用新煮沸過(guò)的冷水來(lái)溶解,從而減少水中溶解氧對(duì)維生素C的影響。


2.2,6-二氯靛酚法


2,6-二氯靛酚是一種氧化還原型的指示劑,利用維生素C的強(qiáng)還原性,可以讓氧化性的紅色溶液還原為無(wú)色的溶液。通過(guò)這種顯著的顏色變化,可以測(cè)定溶液中的維生素C含量。維生素C在酸性溶液中用2,6-二氯靛酚滴定時(shí),滴定至溶液顯玫瑰紅色時(shí),即為終點(diǎn),無(wú)需另加指示劑。在植物體內(nèi),具有還原性的物質(zhì)不只有維生素C,還有其他的還原性的化合物也能夠參與反應(yīng),這樣就會(huì)造成誤差。通過(guò)研究表明,維生素C氧化的速度要比其他化合物反應(yīng)的快,可以避免干擾物質(zhì)的影響,藥典中規(guī)定應(yīng)在2min內(nèi)完成滴定。


3.N-溴琥珀酰亞胺(NBS)滴定法


N-溴琥珀酰亞胺具弱氧化性,而維生素C為強(qiáng)還原劑,當(dāng)有其他還原劑干擾時(shí),N-溴琥珀酰亞胺有選擇性,首先按定量氧化維生素C。滴定的時(shí)候,采用碘化鉀和淀粉作為指示劑,當(dāng)溶液中的維生素C被氧化結(jié)束的時(shí)候,稍微一點(diǎn)點(diǎn)的NBS就能夠氧化碘化鉀,和淀粉指示劑顯示藍(lán)色。



4.紫外分光光度法


 維生素C在酸性的溶液中是比較穩(wěn)定的,但遇到了空氣中的氧、熱、光、堿性物質(zhì),以及銅鐵等金屬離子,就會(huì)促進(jìn)它的氧化速度。它具有π電子的共軛雙鍵化合物、芳香烴化合物等,在紫外光譜下具有強(qiáng)烈的吸收性。維生素C在ph5-6之間是相對(duì)穩(wěn)定的,在波長(zhǎng)267nm(僅供參考)處具有最大吸收,可以通過(guò)維生素C催化氧化前后的變化,測(cè)定溶液中維生素C的含量。



5.高效液相色譜法


以C18和反向柱為固定相,乙腈0.05mol/L醋酸鈉溶液為流動(dòng)相,在216nm的波長(zhǎng)下根據(jù)保留時(shí)間和峰面積進(jìn)行定量檢測(cè)維生素C。


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