m.gamemusichall.net
山楂是薔薇科植物,果實是一味中藥,也可以做成食品。山楂果中包含了很多種生物成分,包括山楂素、槲皮素、山奈酚、蘆丁等成分,其中槲皮素是我們今天說的重點。
槲皮素是一種黃酮醇類化合物,廣泛的分布在植物的莖皮、花、葉、芽、種子、果實中。它有多廣泛呢,據(jù)不完全統(tǒng)計,將近有100多種藥用植物中均含有槲皮素。其中,在蕎麥的桿和葉中,以及山楂中含量都比較高的,當然在蔬菜和水果中也含有很多。
槲皮素在植物中是以糖苷的形式存在,可以通過水解的方式來獲得。常用的制備方法有提取分離、酸水解法、酶轉化法等。那么,槲皮素到底有什么用呢?根據(jù)細胞和動物模型生物活性評估,它具有抗氧化,抑制自由基的形成的作用。槲皮素在人體中的代謝機制,目前還不是很清楚,需要進一步的去探索和研究。
檢測樣品中槲皮素含量的方法,有高效液相色譜(HPLC)法,也有紫外可見光譜法、熒光光譜法。這里我們稍微說一下高效液相色譜法,它的主要步驟和注意事項。
設備和試劑的準備:主要儀器就是HPLC,包括色譜柱、檢測器等。另外,還需要有槲皮素的標準品,山楂樣品,甲醇等。檢測的過程中,采用甲醇-磷酸溶液(45:55)為流動相,檢測波長360nm(根據(jù)最優(yōu)化調試確定)。
檢測過程:先要對標準品進行處理,精密稱量槲皮素,用甲醇稀釋定容,搖勻。對于山楂樣品來說,如果是干燥的話,就需要先將它粉碎過篩,精密稱量,然后加入濃硫酸、甲醇,在水浴加熱回流。檢測過程最為重要的是就是做標準曲線,是利用標準品溶液上機進樣,設定5-6個梯度體積,在HPLC上以最佳的條件進行檢測,測定到對應的峰高和峰面積。以進樣量為橫坐標,以峰面積為縱坐標,計算出槲皮素標準品在實驗中的回歸方程。同時,可以做精密度、穩(wěn)定性、重復性、回收率實驗。
檢測結果:按外標法測定樣品中的槲皮素峰值,計算出槲皮素含量。