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阿魏酸是一種有機物,它是從植物中提取出來的。其中,在阿魏、當歸、川芎、升麻、酸棗仁等中藥材種含量比較高。因此,現(xiàn)在就考慮從川芎中提取并檢測其含量。阿魏酸具有很強的抗氧化活性,抗輻射能力。就檢測方法來說,這里說的是高效液相色譜(HPLC)法。檢測植物體內(nèi)的有機物含量,HPLC法是常用的。
檢測原理:通過對樣品進行處理,比如水浴蒸干,加甲醇熱回流,過濾,殘渣加水溶解,稀鹽酸調(diào)pH=1-2,煮沸,用乙醚提取,殘渣用甲醇溶解,過濾。將獲得的提取液,進入HPLC內(nèi)進行色譜分離(C18色譜柱,流動相甲醇:1%乙酸水= 28:72),用紫外檢測器獲取信號值,在波長323nm的地方就可以測定阿魏酸的吸收值。根據(jù)測定的標準曲線,計算出樣品中的阿魏酸含量。
標準品檢測:先對阿魏酸的標準品進行稀釋,精確稱量30mg阿魏酸標準品,放在50ml的容量瓶中,加入甲醇溶解并定容至刻度,混勻。然后,精密吸取5mL置于50ml的容量瓶中,加入甲醇至刻度,混勻,得到對照品的溶液使用。精密吸取這個標準品溶液2、8、12、16、20μL注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長323nm處測定阿魏酸的峰高和峰面積值,以進樣量對峰面積繪制標準曲線,進行線性回歸,得到回歸方程。
樣品檢測:用移液器吸取10ul的樣品溶液,注入到HPLC內(nèi),還是用波長為323nm的紫外檢測器,測定阿魏酸的峰值和峰面積。根據(jù)標準曲線,計算出阿魏酸的含量。
注意事項:評估方法,做精密度、穩(wěn)定性和重復(fù)性試驗。