獨腳金內酯是一種從棉花根系分泌物中分離出來的新型植物激素，它能夠抑制獨腳金的生長。那么，獨腳金是什么呢？其實是一種雜草，農民不太喜歡它。它是吸取水稻、玉米等農作物的養(yǎng)分，并導致枯萎。雖然如此，它也是一味上好的中藥材。獨腳金內酯能夠調控植物種子萌發(fā)、葉片衰老、根枝構型等生理功能，也和其他植物激素一起調節(jié)生長過程，

檢測植物體內的獨腳金內酯含量，方法有高效液相色譜（HPLC）法、液質聯用（LC-MS）法、酶聯免疫吸附（ELISA）法等。

1.高效液相色譜（HPLC）法

HPLC檢測獨腳金內酯含量，主要包括樣品準備和處理，色譜條件的設置，數據分析和結果處理三個階段。由于獨腳金內酯主要是根系中提取的，如果是植物的樣本，就的要求是新鮮的。在液氮中研磨成粉末，提取，離心，干燥溶解，過濾備用。中間的步驟，參考詳細的檢測規(guī)程和標準。液相方面，主要是對條件的設置，包括色譜柱、流動相、柱溫、流速、進樣量、檢測器等。優(yōu)化參數組合，以最佳的效果展示在色譜峰上，并通過軟件記錄并計算。采用標準曲線的方法，并計算回收率。完成對樣品的檢測，根據色譜峰的峰面積，結合標準曲線，計算出樣品中的獨腳金內酯含量。

2.酶聯免疫吸附（ELISA）法

這里采用的ELISA是雙抗體夾心法，往預先包被植物獨腳金內酯捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物獨腳金內酯呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），根據標準曲線，計算樣品濃度。