膽固醇是一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物，是哺乳動(dòng)物體內(nèi)主要的甾體類化合物，在細(xì)胞生命活動(dòng)中起著重要的作用。在血液中，膽固醇通過(guò)一系列的酶和代謝途徑，參與機(jī)體內(nèi)各種物質(zhì)的代謝，包括糖、蛋白質(zhì)、脂肪、礦物質(zhì)等代謝。

檢測(cè)樣本中膽固醇的含量，主要方法有高效液相色譜（HPLC）法和液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS）法。這里，簡(jiǎn)單的介紹一下，以便參考。

HPLC測(cè)膽固醇，主要包括樣品處理、色譜條件設(shè)置、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制、樣品檢測(cè)、結(jié)果計(jì)算等過(guò)程?？雌饋?lái)是比較簡(jiǎn)單的，其實(shí)操作起來(lái)，還是非?？简?yàn)基本功的。操作過(guò)程中，要依據(jù)相關(guān)的規(guī)程和標(biāo)準(zhǔn)，有效完成相關(guān)的步驟。比如樣品的處理，根據(jù)不同類型的樣品，采用不同的方法，實(shí)現(xiàn)提取、純化等步驟，盡可能的去除雜質(zhì)，以便于檢測(cè)出膽固醇的真實(shí)含量。

對(duì)HPLC儀器的操作，是離不開(kāi)檢測(cè)方法的。沒(méi)有檢測(cè)方法，儀器也運(yùn)轉(zhuǎn)不起來(lái)。設(shè)備的運(yùn)轉(zhuǎn)，其實(shí)也是方法在盡顯。它包括了選擇適合的色譜柱（如C18），流動(dòng)相讓化合物有序從固定相洗脫出來(lái)（如乙腈-甲醇-異丙醇溶液），還必須同時(shí)考慮流速、柱溫、進(jìn)樣量、檢測(cè)器波長(zhǎng)等參數(shù)，以確保膽固醇能夠有效得到分離和檢測(cè)出來(lái)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，是要在色譜峰跑的基本正常的情況下，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行梯度稀釋，并在設(shè)置好的色譜條件下測(cè)定并記錄色譜峰和數(shù)據(jù)。標(biāo)準(zhǔn)膽固醇的濃度對(duì)應(yīng)峰高或峰面積，一一對(duì)應(yīng)，可以繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算出回歸方程。這個(gè)時(shí)候，也要計(jì)算回收率。這樣，才能將這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)用到樣品檢測(cè)的計(jì)算中。

樣品檢測(cè)和計(jì)算，將處理好的樣品注入液相色譜儀中，根據(jù)設(shè)定的色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，并記錄膽固醇的峰面積或峰高。將樣品的峰面積或峰高代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中，計(jì)算出樣品中膽固醇的濃度。

LC-MS結(jié)合了液相色譜的分離能力和質(zhì)譜的鑒定能力，其基本步驟與HPLC類似，但在檢測(cè)部分更加復(fù)雜和精細(xì)。通常包括樣品的進(jìn)樣、液相色譜分離、質(zhì)譜檢測(cè)和數(shù)據(jù)分析等步驟。