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赤蘚糖醇含量檢測(cè)方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-08-01 | 379 次瀏覽 | 分享到:

赤蘚糖醇是一種四碳糖醇,在自然界中普遍存在,比如甜瓜、葡萄、梨、蘑菇等都有發(fā)現(xiàn)。它具有爽口的甜味,可以作為甜味劑,應(yīng)用于多種食品。對(duì)酸、熱十分穩(wěn)定,耐酸耐堿性都很高,在200℃溫度以下也不會(huì)發(fā)生分解和變化,不會(huì)發(fā)生美拉德反應(yīng)而發(fā)生變色。



檢測(cè)樣本中赤蘚醇糖含量的方法有許多,比如高效液相色譜(HPLC)法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)法、紫外-可見分光光度法(UV-Vis)。根據(jù)檢測(cè)需求和檢測(cè)限來確定用哪種方法,沒有特別的限制。


1.高效液相色譜(HPLC)法


這是一種經(jīng)典的方法,它經(jīng)常被用于檢測(cè)化合物含量。系統(tǒng)是可以根據(jù)參數(shù)有所變化,適應(yīng)各種樣品的檢測(cè)需求。使用理性的色譜柱,根據(jù)化合物分配系數(shù)不同,在色譜柱中進(jìn)行分離。使用有效的流動(dòng)相配比,能夠?qū)⑸V柱中目標(biāo)化合物根據(jù)先后順序洗脫出來。洗脫出來的化合物,要進(jìn)入檢測(cè)器中測(cè)定。為了獲得準(zhǔn)確的、完整的目標(biāo)化合物色譜峰,就要調(diào)節(jié)其他參數(shù)。比如,柱溫,一般是室溫,根據(jù)情況可以設(shè)置對(duì)應(yīng)的溫度。流動(dòng)相的流速設(shè)置是很關(guān)鍵的,它決定了色譜峰的高低。當(dāng)流速增加的時(shí)候,在短時(shí)間內(nèi)洗脫出來的化合物就多,峰高就高。而流動(dòng)相配比也是有梯度的,有機(jī)相的比例會(huì)逐步提升,從而獲得更完整的色譜峰。選擇能夠準(zhǔn)確檢測(cè)目標(biāo)化合物的檢測(cè)器,設(shè)置好對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng),檢測(cè)出峰后,就進(jìn)入色譜數(shù)據(jù)分析階段了。



2.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)法


GC-MS是利用了氣相色譜的分離特點(diǎn),以及質(zhì)譜檢測(cè)器的高靈敏、高分辨率的優(yōu)勢(shì),對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行定性和定量分析。氣相色譜分離,就要滿足使用的條件。直接上樣品,恐怕不太行。需要將樣品衍生化,設(shè)置好對(duì)應(yīng)的參數(shù),并按標(biāo)準(zhǔn)步驟將樣品注入到氣相色譜儀中進(jìn)行分離,在質(zhì)譜檢測(cè)器上進(jìn)行分析。這種方法能夠同時(shí)確定目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)信息,計(jì)算出樣品的定量信息,具有較高的準(zhǔn)確性和可靠性。這種方法,需要有專業(yè)設(shè)備和數(shù)據(jù)分析能力。



3. 紫外-可見分光光度法(UV-Vis)


UV-Vis是一種簡(jiǎn)單的、快速的檢測(cè)方法,它適合于大批量的樣品檢測(cè)。檢測(cè)的原理是:利用赤蘚糖醇在紫外或可見光區(qū)域的吸收特性進(jìn)行檢測(cè),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出樣品中的赤蘚糖醇含量。


首先,要知道在哪個(gè)波長(zhǎng)下測(cè)定能測(cè)定最佳的吸光度值,如果不知道的話可以掃描一遍或多測(cè)幾個(gè)點(diǎn)。其次,配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。這里的標(biāo)準(zhǔn)品,是進(jìn)行梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,濃度是可以計(jì)算出來的。在特定波長(zhǎng)處測(cè)定對(duì)應(yīng)吸光度值,對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)濃度可以繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在相同的條件下,測(cè)定樣品的吸光度值,可以多測(cè)幾次,求取平均值。最后呢,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線或回歸方程,計(jì)算出樣品中的赤蘚糖醇含量。方法簡(jiǎn)單,沒有上面兩種方法那么靈敏。


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