烏頭堿是一種雙酯類生物堿，分子中的酯鍵產(chǎn)生毒性。主要存在川烏、草烏、附子等植物中，溶于無水乙醇、乙醚和水。檢測植物樣本中的烏頭堿含量，主要方法包括氣相色譜（GC）法、高效液相色譜（HPLC）法、液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS）法、紫外分光光度法等。這里簡單的介紹一些，便于參考。

1.高效液相色譜（HPLC）法

HPLC檢測樣品中的生物堿，主要包括樣品處理-色譜條件設(shè)置-進(jìn)樣-標(biāo)準(zhǔn)曲線制作-數(shù)據(jù)計(jì)算等過程。對于做實(shí)驗(yàn)的人來說，樣品處理是很基礎(chǔ)的，也是非常重要的。樣品處理不好，后面做的再好，數(shù)據(jù)也是不真實(shí)的。樣品處理包括方法和順序，方法包括提取、洗滌等，按順序操作，避免出現(xiàn)錯(cuò)誤。同時(shí)，也要注意它具有毒性，做好防護(hù)和廢液處理。提取后的烏頭堿樣品，進(jìn)樣到HPLC中測定色譜峰，對峰高或峰面積進(jìn)行分析。

測定樣品中烏頭堿含量，避不開標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。標(biāo)準(zhǔn)曲線就是一把尺子，尺子做好了，測量結(jié)果就想對準(zhǔn)確一些。使用烏頭堿的標(biāo)準(zhǔn)品，梯度進(jìn)樣到HPLC中，根據(jù)對應(yīng)濃度的峰面積，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算回歸方程。要計(jì)算樣品中的烏頭堿，還要考慮一個(gè)回收率的問題。就是標(biāo)準(zhǔn)品上標(biāo)記的濃度，和通過色譜峰計(jì)算出來的濃度還是有一點(diǎn)差別的，將這個(gè)差別給計(jì)算出來，并回歸到樣品檢測過程，才能得出想對準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和結(jié)果。

這個(gè)過程看似是順利的，其實(shí)還是有條件的。這個(gè)就是色譜條件，它之所以能夠測很多種類的樣品和指標(biāo)，在于參數(shù)調(diào)節(jié)的靈活性。比如，色譜柱，流動(dòng)相，進(jìn)樣量，進(jìn)樣速率，柱溫等，通過最優(yōu)化的組合設(shè)計(jì)，獲取最佳的檢測結(jié)果。如果有國標(biāo)或藥典可以參考，也是可以拿來用的，要考慮驗(yàn)證。

2.液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS）法

LC-MS是在HPLC的分離基礎(chǔ)上，連接了高靈敏度、高分辨率的質(zhì)譜儀。質(zhì)譜是可以對生物堿進(jìn)行定性和定量分析，在電磁場的作用下，以荷質(zhì)比為橫坐標(biāo)，離子強(qiáng)度為縱坐標(biāo)。離子出現(xiàn)的頻率或強(qiáng)度，是分析化合物結(jié)構(gòu)的重要參數(shù)。這種方法適用于復(fù)雜樣品中的烏頭堿含量檢測，同時(shí)，還能測出其代謝產(chǎn)物的信息。

除了以上的檢測方法外，還有紫外分光光度法，即在特定波長下，測定烏頭堿的含量。也是要先處理樣品，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后計(jì)算數(shù)據(jù)。這種方法簡單快捷，適合于初期的篩選和定量分析。