酪氨酸酶是一種含有銅糖蛋白的單酚單加氧酶，含有多個(gè)亞基，結(jié)構(gòu)復(fù)雜。廣泛存在于植物、酵母和動物組織中。它是調(diào)節(jié)黑色素生成的限速酶，比切片的馬鈴薯暴露在空氣中變黑，其實(shí)就是被酪氨酸酶氧化了。它對昆蟲的免疫和生長有重要的影響。用途比較多，在皮膚美白、抗氧化作用等方面表現(xiàn)尤為突出。

檢測樣本中的酪氨酸酶活性，方法主要有比色法和酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法。這里，簡單的介紹一下它們的原理和步驟，希望能夠有初步的了解。

1.比色法

檢測原理：酪氨酸酶催化L-多巴生成多巴色素，其在475nm下有特征吸收峰，進(jìn)而測定出酪氨酸酶的活性。

檢測流程：樣本處理（組織、細(xì)胞、血清或血漿），分光光度計(jì)設(shè)置，加樣，溫浴，測定吸光度值，根據(jù)公式計(jì)算酪氨酸酶活?，F(xiàn)在有生化試劑盒，具體步驟可以參考說明書。

2.酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法

以小鼠酪氨酸酶（TRY）為例，這是一種試劑盒的方法，一種雙抗體夾心的檢測。將抗小鼠TRY抗體包被在96微孔酶標(biāo)板上，試劑盒是現(xiàn)成的。實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的TRY和包被抗體結(jié)合，其中游離的部分被洗去。接著加入過氧化氫酶標(biāo)記的親和素。

TRY抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠TRY結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物（TMB），TMB在過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，TRY濃度與吸光度值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中TRY的濃度。詳細(xì)參考說明書。