顧名思義，吲哚乙酸氧化酶就是一種能夠氧化吲哚乙酸的酶。它是含有鐵的血紅蛋白，以二價錳離子和一元酚為輔因子，參與植物吲哚乙酸的代謝過程，調節(jié)吲哚乙酸的水平，從而影響植物的生長。吲哚乙酸分布在生長旺盛的地方，而吲哚乙酸氧化酶則分布在生長不旺盛的部位。在參與氧化的過程中，降解產物包括二氧化碳和3-亞甲基羥吲哚等。酶活的大小，可以通過吲哚乙酸被破壞的速率來表示。檢測方法一般采用分光光度法來測定。

檢測原理：在無機酸存在的情況下，吲哚乙酸和FeCl3發(fā)生反應，生成紅色的螯合物。該物質在530nm的波長處具有最大的吸收峰，利用這個特點就可以測定吲哚乙酸被氧化的速度了。對標準品進行梯度稀釋，并上機檢測吸光度值，以濃度為橫坐標，以吸光度值為縱坐標，制作標準曲線。在同樣的條件下，檢測樣品吸光度值，可以多做幾個重復，求取平均值。結合標準曲線，計算出樣品中的吲哚乙酸含量，進一步計算吲哚乙酸氧化酶的活性。

開始要做的是吲哚乙酸氧化酶的提取，稱取0.3g的玉米幼苗胚芽，加入預冷的磷酸緩沖液1.5mL，冰浴中研磨。取出來4000rpm離心10分鐘，去上清液，就是粗酶液了。

氧化實驗，取0.5mlMnCl2和0.5ml的2,4-二氯酚，以0.5ml的吲哚乙酸的底物中，加入1ml的酶液，在2.5ml的磷酸緩沖液中，25℃水浴中保溫30min，進行反應?？瞻讓φ盏脑挘サ?ml的酶液，其他的都正常程序走下去。

30min后，取2個試管，每個試管中裝入0.5mol/LFeCl3+35%過氯酸（V：V=1:50）混合溶液4ml。再向這2個試管中加入上面反應后的溶液2ml，和空白溶液2ml。這2個試管在40℃保溫30min，反應液會呈紅色。調節(jié)分光光度計，在530nm波長處測OD值。

下面，就是要制作標準曲線。取7個試管，分別加入0.5mol/LFeCl3+35%過氯酸（V：V=1:50）混合溶液2ml，再加入梯度濃度的吲哚乙酸溶液1ml，以0管溶液調零，分別測定530nm處的吸光度值。以濃度為橫坐標，以吸光度值為縱坐標，制作標準曲線。計算出樣品中的吲哚乙酸含量，這個時候，根據(jù)公式計算吲哚乙酸氧化酶的活性。