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檢測瓜氨酸含量的方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2024-08-13 | 207 次瀏覽 | 分享到:

瓜氨酸是一種α-氨基酸,化學式為C6H13N3O3,最早是從西瓜中提取的,因此而得名“瓜氨酸”。其實,在代謝的過程中,它是由精氨酸被氧化成N-羥基-精氨酸,繼續(xù)氧化生成瓜氨酸和一氧化氮。瓜氨酸具有較強的抗氧化能力,可以清除體內的自由基,減少自由基對正常細胞造成的損傷。除了西瓜,在苦瓜、洋蔥、堅果、鷹嘴豆、花生、南瓜、黃瓜、葫蘆等水果蔬菜中都含有瓜氨酸。



檢測植物樣本中的瓜氨酸含量,主要的方法包括高效液相色譜(HPLC)法、液質聯(lián)用(LC-MS)法、分光光度法等。


1.高效液相色譜(HPLC)法


HPLC檢測瓜氨酸,主要步驟包括:試劑準備、樣品制備、色譜條件設置、標準曲線、樣品檢測、結果處理等。其中,色譜條件的設置包括色譜柱、流動相(梯度洗脫)、柱溫、流速、進樣量、檢測器及波長等,實現(xiàn)最優(yōu)化設計組合,檢測出最佳的分離效果和色譜峰。每個參數(shù)都是非常關鍵的,小的細節(jié)也可能影響到最終的結果。因此,HPLC檢測是一個認真的、負責的、不斷優(yōu)化的實驗過程。標準品的梯度進樣,獲得不同濃度下的色譜峰。通過色譜峰面積和標準品濃度的對應關系,制作出標準曲線,計算出回歸方程和回收率。樣品檢測,也是以同樣的條件進行,并結合標準曲線,計算出最終的結果。



2.液質聯(lián)用(LC-MS)法


液相能夠將化合物中的瓜氨酸有效分離出來,而質譜可以對瓜氨酸進行定性和定量分析。LC-MS適合多種代謝產(chǎn)物的定量分析,操作相對比較復雜,對儀器和技術要求比較高,但檢測結果是相對準確的。質譜是采用離子碎片的質荷比,準確測定瓜氨酸的含量和結構。


分光光度法:通過測定樣品在特定波長下的吸光度,可以間接計算瓜氨酸的含量。該方法操作簡便、成本低廉,但可能受到其他物質的干擾。


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